Search :
Project
Project Title :
ผลของสายพันธุ์โคตัวรับต่ออัตราการตั้งท้องหลังการย้ายฝากตัวอ่อนโคแช่แข็งโดยวิธี Direct transfer (Effects of recipients breed, BSA in freezing medium and hCG treated recipients on the conception rate after direct transfer of beef cattle frozen embryos)
downloaded 19 times
Researcher Name :
รังสรรค์ พาลพ่าย (Rangsun Parnpai)
Abstract :
บทคัดย่อ การแช่แข็งตัวอ่อนที่ผลิตในร่างกายและในหลอดแก้วด้วยวิธี slow-freezing มีการใช้กันอย่างแพร่หลาย ในการศึกษาครั้งนี้เพื่อศึกษาผลของสายพันธุ์โคตัวรับ bovine serum albumin (BSA) ในน้ำยาแช่แข็งและการฉีดฮอร์โมน human chlorionic gonadotropin (hCG) ต่ออัตราการตั้งท้องหลังจากย้ายฝากตัวอ่อนโคเนื้อแช่แข็ง ผลิตตัวอ่อนโคเนื้อด้วยการผสมเทียมน้ำเชื้อโคบราห์มันให้กับโคบราห์มันตัวรับที่กระตุ้นให้ตกไข่เป็นจำนวนมาก ในวันที่ 7 หลังการผสมเทียมทำการชะล้างตัวอ่อนออกมาด้วยน้ำยา Dulbecco phosphate buffer saline ที่มี 1% fetal bovine serum จากการชะล้างตัวอ่อน 82 ครั้ง ได้ตัวอ่อนทั้งหมด 528 ใบ ซึ่งเป็นตัวอ่อนเกรด 1 และ 2 จำนวน 369 ใบ (69.9%) ตัวอ่อนเกรด 3 และ 4 จำนวน 71 ใบ (13.4%) ตัวอ่อนที่สลายตัวจำนวน 39 ใบ (7.4%) และไข่ที่ไม่ปฏิสนธิ 49 ใบ (9.3%) ทำการแช่แข็งตัวอ่อนเกรด 1 และ 2 ในน้ำยาแช่แข็งที่มี 1.5 M ethylene glycol 0.1 M sucrose และ 4 mg/ml BSA หรือ 6 mg/ml BSA ด้วยวิธี slow freezing จากนั้นทำการย้ายฝากตัวอ่อนภายใน 8 นาทีหลังจากทำละลายให้กับโคตัวรับพันธุ์พื้นเมืองผสมบราห์มัน โคพันธุ์กำแพงแสน โคนมลูกผสมที่ฉีด hCG 1500 ยูนิต อัตราการตั้งท้องหลังย้ายฝากตัวอ่อนสดให้กับโคตัวรับทั้ง 3 สายพันธุ์ (50-55%) ไม่แตกต่างอย่างมีนัยสำคัญทางสถิติและไม่พบความแตกต่างของอัตราการตั้งท้องระหว่างโคที่ฉีดและไม่ฉีด hCG สำหรับอัตราการตั้งท้องของกลุ่มตัวอ่อนแช่แข็งในน้ำยาแช่แข็งที่มี 4 mg/ml หรือ 6 mg/ml BSA ไม่พบความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญทางสถิติ เมื่อย้ายฝากตัวอ่อนแช่แข็งให้กับโคตัวรับสายพันธุ์ต่างๆ ทั้งฉีดและไม่ฉีด hCG (35-40%) อย่างไรก็ตามอัตราการตั้งท้องหลังจากย้ายฝากตัวอ่อนสดให้โคพันธุ์พื้นเมืองผสมบราห์มันที่ฉีด hCG โคพันธุ์กำแพงแสนที่ฉีด hCG และโคนมลูกผสมทั้งที่ฉีด hCG และไม่ฉีด hCG เท่ากับ 55% ซึ่งมีค่าสูงกว่าอัตราการตั้งท้องของกลุ่มตัวอ่อนแช่แข็งในน้ำยาที่มี 4 mg/ml ย้ายฝากให้โคนมลูกผสมที่ไม่ฉีด hCG (30%) อย่างมีนัยสำคัญทางสถิติ (P<0.05) นอกจากนี้ สายพันธุ์โคตัวรับและการฉีด hCG ไม่มีผลต่ออัตราคลอดในกลุ่มตัวอ่อนสด ตัวอ่อนแช่แข็งด้วยน้ำยาที่มี 4 mg/ml BSA และตัวอ่อนแช่แข็งด้วยน้ำยาที่มี 6 mg/ml BSA (50-55%, 30-35% และ 35-40% ตามลำดับ) อย่างไรก็ตาม อัตราคลอดของกลุ่มตัวอ่อนสดที่ย้ายฝากให้โคตัวรับพันธุ์กำแพงแสนและโคนมลูกผสมที่ฉีด hCG (55%) มีค่าสูงกว่าอัตราคลอดของกลุ่มตัวอ่อนแช่แข็งด้วยน้ำยาที่มี 4 mg/ml BSA หลังย้ายฝากให้โคพื้นเมืองผสมบราห์มันและโคนมลูกผสมที่ไม่ได้ฉีด hCG (30%) อย่างมีนัยสำคัญทางสถิติ กล่าวโดยสรุป สายพันธุ์โคตัวรับ การเติม BSA ในน้ำยาแช่แข็งการฉีด hCG ไม่ส่งผลต่ออัตราคลอดของโคตัวรับหลังย้ายฝากตัวอ่อนโคเนื้อแช่แข็งด้วยวิธี direct transfer Abstract Conventional slow-freezing method has been widely used for cryopreservation of in vivo produced embryos. This study was designed to determine the effects of recipients breed, bovine serum albumin (BSA) in freezing medium and human chlorionic gonadotropin (hCG) treated recipients on the conception rate after direct transfer of beef cattle frozen embryos. The in vivo fertilized embryos of Brahman cattle were produced by performing artificial insemination (AI) with Brahman semen after superovulated. On day 7 after AI, the embryos were flushed out using modified Dulbecco phosphate buffer saline supplemented with 1% fetal bovine serum. Total of 82 flushing could get 528 embryos, there were 369 grade 1-2 blastocysts (69.9%), 71 grade 3-4 blastocysts (13.4%), 39 degenerated embryos (7.4%) and 49 unfertilized eggs (9.3%). The grade 1-2 blastocysts were frozen by slow freezing in the freezing medium that consisted of 1.5 M ethylene glycol, 0.1 M sucrose and 4 mg/ml or 6 mg/ml BSA. The frozen embryos were direct- transferred to different recipients breed including Brahman-native hybrid cattle, Komphaengsaen cattle and hybrid milking cattle that receive 1,500 IU of hCG injection or no injection immediately after transferred embryos. The pregnancy rates of fresh embryos were no significantly difference on different recipients breed (50-55%) and no beneficial effect was found in hCG injected recipients. In frozen embryos, there was no significant difference on pregnancy rate of all recipient breed, hCG-treated and non hCG-treated recipients after transferring embryos frozen by 4 mg/ml or 6 mg/ml BSA medium (35-40%). However, the pregnancy rates of hCG-treated Brahman-native hybrid cattle, hCG-treated Komphaengsaen cattle, hCG-treated and non hCG-treated hybrid milking cattle that received fresh embryos (55%) were significantly higher than non hCG-treated hybrid milking cattle that received embryos frozen with 4 mg/ml BSA (30%). Moreover, recipients breed and hCG injection showed no beneficial effect on calving rate of fresh embryos, 4 mg/ml BSA-treated frozen embryos and 6mg/ml BSA-treated frozen embryos (50-55%, 30-35% and 35-40%, respectively). However, calving rates of fresh embryos transferred to hCG-treated Komphaengsaen cattle and hybrid milking cattle (55%) were significantly higher than that of frozen embryos which was treated with 4 mg/ml BSA and transferred to non hCG-treated Brahman-native hybrid cattle and hybrid milking cattle (30%). In conclusion, recipients breed, BSA concentration in freezing medium and hCG-treated recipients did not have any beneficial effect on the conception rate after direct transfer of frozen Brahman cattle embryos.
Publications :
No
View Publications
Detail
Award/Honor :
Name
Sponsor
Get Date
IRD SEARCH
|
IRD LOGIN