Search :

Project Project Title : การประยุกต์ใช้เทคโนโลยีการแสดงโปรตีนบนผิวฟาจในการผลิตแอนติบอดีต่อสารปนเปื้อนโมเลกุลเล็กทางการเกษตร (Application of phage display technology for the production of antibodies against agricultural contaminant haptens)     downloaded 8 times Researcher Name : มณฑารพ ยมาภัย (Montarop Yamabhai) Abstract : บทคัดย่อ ผู้วิจัยประสบความสำเร็จในการประยุกต์ใช้เทคโนโลยีการแสดงโปรตีนบนผิวเฟจในการผลิตแอนติบอดีต่อสารอะฟลาทอกซิน ซึ่งเป็นสารพิษปนเปื้อนโมเลกุลเล็กจากเชื้อรา ที่เป็นสารก่อมะเร็งร้ายแรง และเป็นปัญหาต่อผลผลิตทางการเกษตรของประเทศไทย และประเทศอื่นๆ ที่อยู่ในสภาวะร้อนชื้น ทั่วโลก โดยสามารถทำการคัดหาแอนติบอดี ส่วน scFvที่ความสามารถสูงในการจับกับ อะฟลาทอกซิน จากคลังแอนติบอดี ของมนุษย์ ชื่อคลัง “ย่าโม ๑” ซึ่งเป็นคลังที่ได้สร้างขึ้นเองในห้องปฏิบัติการของผู้วิจัย โดยแอนติบอดีที่คัดหามาได้นี้ มีศักยภาพในการนำไปพัฒนาต่อ ทั้งเพื่อการรักษา และการตรวจวิเคราะห์ โดยในโครงการวิจัยนี้ ผู้วิจัยได้แสดงถึงศักยภาพของการนำไปใช้ในการตรวจวิเคราะห์ การปนเปื้อน ด้วยการนำแอนติบอดีที่คัดหามาได้ ไปพัฒนาให้มีคุณสมบัติเหมาะสมยิ่งขึ้นด้วยกระบวนการวิศวกรรมแอนติบอดี โดยการนำยีนของแอนติบอดีส่วน scFvที่ได้คัดหามาจากคลังย่าโม ๑ ไปเชื่อมต่อกับยีนของเอนไซม์ อัลคาไล ฟอสฟาเทส แล้วนำมาแสดงออกในระบบการผลิตโปรตีนของแบคทีเรีย อีโคไล เพื่อสร้างให้เป็นตัวตรวจสอบแบบสำเร็จในขั้นเดียว ที่สะดวกต่อการนำไปใช้ในการตรวจวิเคราะห์ การปนเปื้อนผลิตภัณฑ์ทางการเกษตร โดยจากการวิเคราะห์คุณสมบัติ และประสิทธิภาพของ แอนติบอดี แบบ scFv-AP ที่ได้พัฒนาขึ้นนั้นพบว่า แอนติบอดีชนิด scFv-AP ที่ได้พัฒนาขึ้นมานี้ มีความไวในการตรวจวัดสาร อะฟลาทอกซินมากกว่าแบบ scFvเปล่าๆ ถึง ๓ เท่า นอกจากนั้นแล้ว ผลจากโครงการวิจัยนี้ยังได้แสดงให้เห็นว่า คลังของแอนติบอดี ย่าโม ๑ ที่ผู้วิจัยได้พัฒนาขึ้นมานั้น มีคุณสมบัติเด่นกว่าคลังทั่วไป เพราะสามารถใช้เป็นแหล่งในการคัดหาแอนติบอดีต่อสารปนเปื้อนโมเลกุลเล็กทางการเกษตรที่มีคุณสมบัติดี ซึ่งอาจเป็นเพราะเป็นคลังที่สร้างขึ้นจากตัวอย่างที่เป็นคนไทยในแถบจังหวัดนครราชสีมา ซึ่งมีอัตราเสี่ยงต่อการบริโภคอาหารที่มี อะฟลาทอกซิน ปนเปื้อนสูง จึงอาจมีแอนติบอดีต่อสารนี้อยู่มาก กว่าคลังแอนติบอดีที่สร้างขึ้นจากประชากรในแถบอื่น หรือแบบกึ่งสังเคราะห์ ผลสำเร็จจากโครงการวิจัยนี้ นอกจากจะเป็นนวตกรรม ต่างๆ ได้แก่ ยีน และ แอนติบอดีที่จำเพาะเจาะจงต่อ อะฟลาทอกซิน วิธีการในการคัดหาแอนติบอดีจากคลัง และรวมทั้งวิธีการทางวิศวกรรมแอนติบอดี เพื่อพัฒนาคุณสมบัติให้มีประสิทธิภาพดี ในการนำไปประยุกต์ใช้ในการตรวจวิเคราะห์สารปนเปื้อนทางการเกษตร อื่นๆ ที่มีประสิทธิภาพสูง แล้ว ยังได้สร้างองค์ความรู้ใหม่ ซึ่งสามารถนำไป ตีพิมพ์ในวารสารวิชาการระดับนานาชาติ ที่ต้องผ่านการประเมินโดยผู้ทรงคุณวุฒิอีกด้วย ซึ่งผลสำเร็จที่ได้ทั้งหมดนี้ สามารถนำไปพัฒนาต่อยอด ในการตรวจสอบสารปนเปื้อนทางการเกษตรอื่นๆ ทั้งที่เป็นสารโมเลกุลเล็ก และโมเลกุลใหญ่ ที่มีความสำคัญต่อผลผลิตทางการเกษตร ในระดับอุตสาหกรรมต่อไป ABSTRACT A unique human phage display library was used to successfully generate a scFv to the highly carcinogenic toxin aflatoxin B1. Such an antibody has major potential applications in therapy and diagnostics. Tofurther exploit its analytical capacity, the scFv was genetically fused to alkaline phosphatase, thereby generatinga novel and highly sensitive self-indicating reagent. The performance of this reagent was further characterized,demonstrating its efficacy. The sensitivity of scFv-AP fusion was three-fold better than that of the scFv form. Theability of this human library to generate antibodies to a small hapten was clearly demonstrated and this is linkedto its intrinsic diversity, which exceeds many existing conventional human libraries. Our results indicate thatdemography may influence the diversity of the repertoire of the library in terms of its capacity to generateantibodies to specific targets. Equally, the approach demonstrated should also be applicable for other haptens andlarger antigens. This research project generated not only innovations on the development of novel method todetect agricultural contaminants, but also a novel body of knowledge that could be published in a rigorous peerreviewinternational journal. The outcome of this project could be future adapted for the research anddevelopment of diagnostic tools for various agricultural contaminants in the industrial level in the future. Publications : No  View Publications  Detail Award/Honor :  Name  Sponsor  Get Date

IRD SEARCH | IRD LOGIN